大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶（BrdU）酶联免疫分析试剂盒实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)水平。用纯化的大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入BrdU，再与HRP标记的BrdU抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的BrdU呈正相关。用酶标仪在4*0nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)浓度。

大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)酶联免疫分析试剂盒使用说明书操作步骤

*.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样*0μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品*0μl（样品最终稀释度为*倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

*.温育：用封板膜封板后置**℃温育*0分钟。

4.配液：将*0倍浓缩洗涤液用蒸馏水*0倍稀释后备用

*.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置*0秒后弃去，如此重复*次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶标试剂*0μl，空白孔除外。

*.温育：操作同*。

8.洗涤：操作同*。

*.显色：每孔先加入显色剂A*0μl，再加入显色剂B*0μl，轻轻震荡混匀，**℃避光显色**分钟.

*0.终止：每孔加终止液*0μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

**.测定：以空白空调零，4*0nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后**分钟以内进行。

大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶（BrdU）酶联免疫分析试剂盒使用说明书注意事项

*．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡**-*0分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

*．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间*控制在*分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

4．请每次测定的同时做标准曲线，*做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*乘以总稀释倍数（×n×*）。

*．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

*．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

*．本试剂不同批号组分不得混用。

*0.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶（BrdU）酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期

*．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月