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大鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒

分类:诊断试剂 发布时间:2018-11-12 15:59 所在地:
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大鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒实验原理


本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠β内啡肽(β-EP)水平。用纯化的大鼠β内


啡肽(β-EP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β内啡肽(β


-EP),再与 HRP 标记的β内啡肽(β-EP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过


彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化


成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的β内啡肽(β-EP)呈正相关。用酶标仪在 4*0nm 波长


下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠β内啡肽(β-EP)浓度。   


试剂盒组成   


*  *0 倍浓缩洗涤液  20ml×*瓶  *  终止液  6ml×* 瓶


2  酶标试剂  6ml×*瓶  8  标准品(*200pg/ml)  0.*ml×* 瓶


*  酶标包被板  *2 孔×8条  *  标准品稀释液  *.*ml×* 瓶


4  样品稀释液  6ml×*瓶  *0  说明书  * 份


*  显色剂A 液  6ml×*瓶  **  封板膜  2 张     


6  显色剂B液  6ml×*/瓶  *2  密封袋  * 个


标本要求   


*.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能


马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融


2.不能检测含NaN*的样品,因NaN*抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。


大鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒操作步骤 
*.  标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀


释。


*600pg/ml  * 号标准品  **0µl的原倍标准品加入**0µl标准品稀释液


800pg/ml  4 号标准品  **0µl的* 号标准品加入**0µl标准品稀释液


400pg/ml  * 号标准品  **0µl的4 号标准品加入**0µl标准品稀释液


200pg/ml  2 号标准品  **0µl的* 号标准品加入**0µl标准品稀释液


*00pg/ml  * 号标准品  **0µl的2 号标准品加入**0µl标准品稀释液


 2.  加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同) 、标准孔、


待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样*0µl, 待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品*0µl(样品zui终稀释度为*倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽


量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。


*.  温育:用封板膜封板后置**℃温育*0分钟。       


4.  配液:将*0 倍浓缩洗涤液用蒸馏水*0 倍稀释后备用


*.  洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 *0 秒后弃去,如此


重复 *次,拍干。


6.  加酶:每孔加入酶标试剂*0µl,空白孔除外。   


*.  温育:操作同*。


8.  洗涤:操作同*。


*.  显色:每孔先加入显色剂A*0µl,再加入显色剂B*0µl,轻轻震荡混匀,**℃避光显色


** 分钟.


*0.  终止:每孔加终止液 *0µl,终止反应(此时蓝色立转黄色) 。


**.  测定:以空白空调零,4*0nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值) 。 测定应在加终止


液后 **分钟以内进行。


大鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒注意事项 
*.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 **-*0 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未


用完,板条应装入密封袋中保存。


2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。


*.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zui好


控制在* 分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。


4. 请每次测定的同时做标准曲线,zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值


大于标准品孔*孔的OD 值) ,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计


算时请zui后乘以总稀释倍数(×n×*) 。


*. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。


6.底物请避光保存。


*.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.


8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。


*.本试剂不同批号组分不得混用。


*0.  如与英文说明书有异,以英文说明书为准。


大鼠β内啡肽(β-EP)试剂盒保存条件及有效期


*.试剂盒保存: ;2-8℃。


2.有效期:6个月

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