· 仪器硬件问题：

· 激光相关问题：激光功率不稳定或光路偏移可能导致此故障。激光功率异常会影响荧光激发效率，导致荧光强度降低，同时可能使信号波动大，造成 CV 值偏高。可检查激光功率是否在正常范围，若不正常，联系工程师进行光路校准和激光功率调整。

· 流动室或管路堵塞：流动室或喷嘴堵塞会使液流不稳定，微球流速异常，影响细胞或微球通过激光检测区域的一致性，导致 CV 值升高，也可能因液流对荧光信号的影响使荧光强度降低。可参照仪器手册，用去离子水或 70% 乙醇冲洗管路，清洁流动室，必要时使用专用的堵塞清理工具进行处理。

· 光电倍增管（PMT）故障：PMT 电压漂移或灵敏度下降，会使检测到的荧光信号强度发生变化，且信号稳定性变差。可尝试重置 PMT 电压至默认值，然后重新优化电压参数，若问题仍未解决，可能需要更换 PMT。

· 软件设置问题：

· 校准参数错误：若软件中选择的微球类型与实际使用的不匹配，或通道设置不正确，会导致仪器对微球信号的识别和分析出现偏差，引起 CV 值异常和荧光强度显示不准确。需确认软件中设置的微球类型、通道匹配等参数是否正确。

· 荧光补偿设置不当：当使用多种荧光染料时，若补偿矩阵设置错误或未及时重置，会因荧光渗漏干扰结果，导致 CV 值偏高，同时可能使荧光强度测量不准确。可校准前关闭补偿，或使用单色微球单独校准各通道，重新设置正确的补偿矩阵。

· 样本相关问题：

· 微球问题：若用于 QC 检测的微球过期、储存不当、浓度异常或受到污染，会导致信号强度异常、数据点分散等问题，使 CV 值偏高，荧光强度也可能因微球性能变化而降低。需检查微球有效期，确认是否避光、低温保存，按说明书要求稀释微球，使用前涡旋混匀，并通过滤网去除聚集体。

· 细胞样本问题：如果是细胞样本检测，细胞悬液中细胞聚集，会导致多个细胞被误认为一个，影响细胞计数和荧光检测的准确性，使 CV 值升高。细胞活性不佳或死亡，会影响标志物的表达，导致荧光强度降低。应确保制备的细胞悬液为单细胞悬液，染色前轻轻吹打，上样前再次混匀，同时保证细胞样本的活性。

· 环境因素影响：温度或湿度波动可能影响仪器性能和试剂活性，进而导致检测结果不稳定，CV 值偏高，荧光强度异常。应确保实验室温度恒定（如 25℃±2℃），湿度低于 60%，并将仪器远离大型电器，确保仪器接地良好，避免电磁干扰。