安捷伦 流式细胞仪 NovoCyte D3000640 。需要解决640通道cv较大,QC不通过问题。图片分析,仪器后方有渗液结晶,估计内部有配件损坏,最好远程打开后盖板拍照。需要与用户确认更换过液路系统过滤器没有。。需要上门维护
流动室与液路稳定性
· 执行 Prime 操作 排除流动室气泡,确认鞘液流量正常(废液流速约 90ml/5分钟)。
· 检查 喷嘴密封圈 是否老化漏气或堵塞(可用 10% 次氯酸钠冲洗堵孔)。
· 更换 鞘液过滤器,避免颗粒物干扰鞘流稳定性。
光路校准与检测器优化
· 清洁 640nm 激光窗口及对应滤光片,排除尘埃污染导致信号散射异常。
· 通过 NovoExpress 软件 校准 PMT 电压,确保增益设置适配荧光信号范围(动态范围需覆盖弱/强信号)。
样本制备优化
· 控制细胞浓度在 1×10⁵–1×10⁶个/mL,减少聚集或流速不均导致的信号波动。
· 对样本进行过滤(如 40μm 滤网)或轻柔吹打,避免细胞团块堵塞进样针。
抗体与染料问题
· 确认荧光抗体 储存条件正确(避光冷藏,避免沉淀析出),稀释比例适配目标抗原表达水平。
· 检查 补偿矩阵 是否误覆盖 640nm 通道,建议重新运行单色对照调整补偿。
调整项 | 操作建议 |
信号采集速率 | 降低样本流速至 中速(如≤30μL/min),提升信号稳定性 |
触发阈值 | 设置 FSC/SSC 触发阈值 排除碎片干扰,减少背景信号对CV影响 |
PMT动态范围 | 启用 宽动态检测模式(动态范围≥7.2个数量级),避免信号饱和或丢失 |
周期性校准
· 每日开机后运行 CST(系统适用性测试)微球,监测640通道CV值趋势。
· 每年由工程师进行 光路校准及压力传感器校验 以维持基线稳定性。
耗材更换
· 每季度更换 鞘液管路密封圈 和 过滤器,防止漏液或压力波动。
· 使用原厂 SCS系列校准品 验证绝对计数精度。
· 若CV值持续异常,尝试 短时间(30分钟)高速鞘液冲洗 清除管路残留