3100 型遗传分析仪的应用

1.工作原理 在合成的寡核苷酸引物同单链 DNA 模板退火的反应中,除了含有DNA聚合酶和四种正常的dNTP外还有用非放射性荧光素标记的
 1.工作原理

       在合成的寡核苷酸引物同单链 DNA 模板退火的反
应中,除了含有DNA聚合酶和四种正常的dNTP外还有用非放射性荧光素标记的ddNTP,ddNTP的3-H′ 取代了普通脱氧核糖 3-OH′,在DNA链的延伸时dNTP与ddNTP展开竞争,如果是dNTP,延伸反应继续进行,如果是ddNTP,由于缺少3-OH′将会阻断后续dNTP形成磷脂二脂键,延伸进一步被终止,反应产生大量的寡核苷酸链,这些产物可用凝胶电泳分离,染料分子用激光激活,并且荧光信号被放大再被光电倍增管捕获,根据每种不同染料的颜色来判断不同的核苷酸,根据荧光峰的形状和连续峰之间的距离识别每一个碱基。

2.主要特点 

        3100型遗传分析仪操作简单,仅需安装毛细管、注射器,将装有预处理样品的样品板放置于自动进样器上后便可运行。在自动进样器上一次可放置2个96孔或3 8 4孔板。一旦样品板放好后,样品被自动吸入毛细管,在电场作用下泳动,并根据用户设定的参数进行分析,可连续分析多达768个样品。每一轮16个样品的测定工作均为自动完成,直至测完样品盘中的所有样品。3100型遗体分析仪采用光栅CCD荧光检测技术(四色荧光标记技术),实现多色荧光同时检测,从激光光源发出的光线被光学元件分成两股,16根毛细管被一束激光同时从两面照射,有效提高荧光检测灵敏度和均一性。

        3100型专用的序列分析软件(Seq Analysia)和片断分析软件(GeneMapper)可以对结果进行自动分析。

        3.3100型遗传分析仪的应用
3100型遗传分析仪能够完成对新基因序列的测定或比较测序工作。此外,还可进行多种片段分析,包括微卫星DNA分析(SSR)、限制性片段长度多态性分析(AFLP)、比较基因型分析、单核苷酸多态性(SNP)、单链构象多态性分析(SSCP)等。3100遗传分析仪有两种专利液体分离胶,分别为POP4和POP6,并且有多种长度选择的自动涂层毛细管(22cm,36cm,50cm,80cm),可以满足不同的应用需求(见表1)。


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