谈Triturus全自动酶免仪的维护与常见故障处理

2004年6月我科引进了西班牙Triturus全自动酶免仪(变色龙)。该仪器具有完成所有ELISA 板测试步骤的功能,其开放式全自动酶免系统

2004年6月我科引进了西班牙Triturus全自动酶免仪(变色龙)。该仪器具有完成所有ELISA 板测试步骤的功能,其开放式全自动酶免系统,可以连续进行ELISA 板块的测试,具有自动检测故障的功能,可提示故障原因并报警。经过一段时间的实际操作,本人对仪器维护和一些常见问题及处理方法进行了总结,现介绍如下:

1. 操作

1.1 拼板 变色龙有2 根加样针,有4 个孵育位,一次最多只能放4 块酶标板。装上微孔板 、样品、试剂及 TIP 以后,整个检测过程可以自动进行:加样、换TIP、加热孵育(可选择摇摆,时间可调)、洗板、加显色剂、比色,cut —of f 值自动判读报告结果,全自动完成,而且可在一块板上做不同的项目,以达到组合的最优化,有效提高了检测效率。我室采用第一块板做H IV抗体,第二块板做HCV 抗体,第三块板做AFP,这样既可以节省时间,又可防止同批次内Tip头堵塞。高纯等⋯将H BsAg与H BsAb,HBeAg 与HBeAb各半块分别拼成一块板,HBcAb半块板。这样“拼板”,每批可同时处理5个项目,也是可取的经验。

1.2 编制控制流程 主控计算机的操作软件使用较方便,编制控制流程也比较容易,在设置完整反应步骤试验程序的同时,编辑几套应急反应程序。当仪器故障或其他原因致使试验不能完成时,可复制原程序,删除已完成的步骤后再进行。

1.3 洗板 在“wash cyclex”的编程中,将加注洗液体积设置为“渐增式灌洗模式”。例如,加注洗液次数为5 次,吴祥等将加注洗液体积依次设为200,250,300 ,300,300 p,1,目的是避免阳性标本加注洗液时形成的阳性稀释液外溢,减少了污染面积。

2. 维护

2.1日常维护

 ①每天实验前检查注射器有无漏水痕迹或盐渍,若发现大量漏水,应立即关机切断电源。

②每天开机前,分别做一次冲洗(Rinse)和灌注(Priming)并仔细观察洗板头水流是否通畅。一批试验做完后,尽快做一次冲洗,一天工作完成后,至少做2 次冲洗并做一次“手工清洗加样针”(Man—ual Probe Washing) ,用棉球蘸75%酒精擦洗针头和白色绝缘体,然后排空废液。

③关机后,打开蒸馏水瓶的盖,使管道内压力与大气压平衡。

④做好仪器的内外清洁,特别是样品盘、加样针冲洗槽及试剂架的清洁。

2.2 定期维护 严格按照仪器维护说明,进行日、月、年的维护,此处不再赘述。

2.3 液路系统维护 液路要经常清洗,以防止管路中产生沉淀影响正常的吸液。

2.3.1 液体瓶 液路系统有五个4 L 的液体瓶液体瓶初始化液瓶、蒸馏水瓶、洗液A 瓶、洗液B 瓶和废液瓶;所有瓶子都有液面感应;废液瓶还具有(通过软件控制) 自动排空功能。

2.3.2 消毒液路 在“others”次菜单中选择“消毒”按下列步骤操作:在蒸馏水容器位换一个盛有0.5%的次氯酸钠容器,按ENTER 以继续,系统将自动用次氯酸钠注满整个液路并保存15 min ,换回蒸馏水瓶,按ENTER 以继续,系统将自动用蒸馏水漂洗液路 。

2.4 加样针维护  试验前一定要认真检查加样针是否光洁干燥,即使微小液珠沾附在加样针表面,也会干扰电容电压的正确改变,从而影响其对液面的正确探测和吸样,引发故障。

①先用沾有70%酒精的软布清洁表面,让酒精与表面接触时间达到10 min。目的是让粘附蛋白变性,易于擦洗;

②再用沾有蒸馏水的纱布擦洗表面,去除粘附物,清洁加样针表面;

③最后用清洁干燥纱布擦拭,使加样针保持干燥。同时也要保持加样针塑料垫圈的清洁与干燥,否则,其绝缘性能会失效,将直接影响加样针对液面的探测。

2.5 标本维护 血清或血浆分离要充分,标本为血清:最好将血液先自然存放1~2 h后,再用3000r/min 离心15min;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5—10 次,放置一段时问后,3000 r/min离心15 min。为防止纤维蛋白原堵针,最好使用抗凝血,试验用血清(浆)量必须大于300 ill。

2.6 光学系统维护  光度仪处于孵育器的底部,为音叉形状,叉的中问为读板位置。每月用70%酒精非常小心的清洁叉形物的下面。

3 .常见故障及处理

3.1  加样针探测 液面及吸样报警原因:样本试管壁上有液珠、加样针有微小水珠沾附表面(尤其空气湿度> 80%,超长工作时) 、针头有蛋白粘附物导致挂珠现象,均可导致探测液面错误。处理方法:及时用清洁干燥纱布擦拭加样针,行上述加样针维护程序。

3.2 加样针堵塞报警 原因:血清分离不彻底,纤维蛋 白堵塞加样针。或血清量少于300 p,1 时,加样针插入分离胶中造成堵针。处理方法:运行“M isc”里的“Pr im ing”程序进行冲洗,利用内压将凝块压出,避免用捅条疏通,否则,凝块将附于管道内壁不易清除。建议不宜将含分离胶的试管直接上机:特别是使用Triturus 3.0 版本,要求的血清量更大,容易发生加样针甚至整个管道系统堵塞。建议将血清移人另一塑料试管再上机测试 。

3.3  内置洗板机堵孔  原因:盐类结晶常使洗板机堵孔,造成洗板不彻底,试验本底增高。处理方法:每次试验完毕运行“Rinse”程序冲洗管道;如在洗板过程中发现洗液溢出反应微孔,托盘存有积液,应立即暂停试验,小心将洗头拔下进行拆洗,疏通吸水针孔。然后对准洗头后面的管道位置复原到位。

3.4 撞针 加样针的前端较细,使用或维护不当可能会撞弯甚至撞断,常见原因有以下几种:

①当样品盘底部有白色的盐类结晶时,仪器会误判样品盘的初始位,因而撞到样品盘。处理方法:用纱布蘸70%酒精擦拭底座,用记号笔将样品盘底的白色涂黑。

②试管、试剂槽位置放置不当,加样针极有可能被撞断。处理方法:选择与样品盘孔大小匹配的试管,防止其晃动且便于取放。试剂槽一定要准确放到位。

③使用Tip 头加样时,金属加样针在套取Tip 头的过程中,可能会撞弯针尖。处理办法:尽量使用加样针加样,对于HIV 、HCV 、HBsA g 等较敏感项 目的检测,金属加样针吸样后用10×冲洗程序,以有效避免携带污染的干扰。

④废弃的Tip 头堆积到一定的高度会妨碍金属加样针取下Tip 头,当机械臂移动时使加样针针尖折断。处理方法:及时清理废弃的Tip 头。

3.5 仪器识别 标本、孔条,读盘障碍多由防护罩存有污物引发。处理方法:用70%的酒精对防护罩及光路进行清洁。

3.6 机械臂抓放微孔板或盖板时报警  原因:抓臂上的金属感应棒感应失灵。处理方法:打开机械臂,清洁加样针上面的丝杠和滑轨,重新加上新的润滑油;用碳棒上下摩擦金属感应棒。

3.7 温度与湿度 变色龙的工作温度范围为1O℃ 一32℃之间,其加样注射器的外壁与移动杆上的塑料膨胀系数不同,当温度降低时注射器会出现漏水的现象。工作湿度是20%~80 %,空气中的湿度大于50%时,线路板容易受潮,仪器不能正常运转,因此要注意防潮,尤其在梅雨季节要开空调除湿保持室内干燥。

总之,变色龙的维护保养是决定试验成败的关键,若维护不当,则报警频频,造成试验结果的失真,因此,只有充分了解仪器的性能,及时排除故障,才能提高工作效率,得出准确、可靠的实验结果,更好地为临床服务。

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