小鼠胰高血糖素样肽酶联免疫分析试剂盒实验原理：
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰高血糖素样肽  *(GLP-*)水平。用纯化的小鼠胰高血糖素样肽  *(GLP-*)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰高血糖素样肽 *(GLP-*)，再与 HRP标记的胰高血糖素样肽  *(GLP-*)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在 HRP  酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的胰高血糖素样肽*(GLP-*)呈正相关。用酶标仪在 4*0nm波长下测定吸光度（OD  值），通过标准曲线计算样品中小鼠胰高血糖素样肽 *(GLP-*)浓度。
试剂盒组成：
说明书
48孔配置
*份
*6孔配置
*份
保存
封板膜
2片（48）
*个
2片（*6）
*个
密封袋
酶标包被板
标准品：4.*pmol/L
标准品稀释液
酶标试剂
*×48
*×*6
2-8℃保存
2-8℃保存
2-8℃保存
2-8℃保存
2-8℃保存
2-8℃保存
2-8℃保存
2-8℃保存
2-8℃保存
0.*ml×*瓶
*.*ml×*瓶
* ml×*瓶
* ml×*瓶
* ml×*瓶
* ml×*瓶
*ml×*瓶
（20ml×20倍）×*瓶
0.*ml×*瓶
*.*ml×*瓶
6 ml×*瓶
6 ml×*瓶
6 ml×*瓶
6 ml×*瓶
6ml×*瓶
（20ml×*0倍）×*瓶
样品稀释液
显色剂 A液
显色剂 B液
终止液
浓缩洗涤液
小鼠胰高血糖素样肽酶联免疫分析试剂盒样本处理及要求：
*. 血清：室温血液自然凝固 *0-20分钟，离心  20分钟左右（2000-*000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择 EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合 *0-20  分钟后，离心20 分钟左右（2000-*000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
*. 尿液：用无菌管收集，离心 20 分钟左右（2000-*000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心 20分钟左右（2000-*000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用  PBS（PH*.2-*.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到 *00万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分*钟左右（2000-*000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
*.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的   PBS，PH*.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持  2-8℃的温度。加入一定量的  PBS（PH*.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心 20分钟左右（2000-*000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。
6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.
*.不能检测含NaN*的样品，因     NaN*抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤
*.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔 *0孔，在*、第二孔中分别加标准品 *00μl，然后在*、第二孔中加标准品稀释液 *0μl，混匀；然后从*孔、第二孔中各取 *00μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液  *0μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取 *0μl弃掉，再各取  *0μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液 *0ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取 *0μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液   *0μl，混匀后从第七、第八孔中分别取 *0μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液 *0μl，混匀后从第九第十孔中各取 *0μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为  *0μl，浓度分别为 *pmol/L，2pmol/L，*pmol/L，0.*pmol/L，    0.2*pmol/L）。
加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样
品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液 40μl，然后再加待测样品 *0μl（样品zui终稀释度为 *倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置 **℃温育*0分钟。
配液：将 *0（48T的  20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水  *0（48T的  20倍）倍稀释后备用
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 *0秒后弃去，如此重复 *次，拍干加酶：每孔加入酶标试剂 *0μl，空白孔除外。
温育：操作同 *。
洗涤：操作同 *。
显色：每孔先加入显色剂 A*0μl，再加入显色剂 B*0μl，轻轻震荡混匀，**℃避光显色**分钟.
*0.终止：每孔加终止液    *0μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
**.测定：以空白空调零，4*0nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 **分钟以内进行。

小鼠胰高血糖素样肽酶联免疫分析试剂盒注意事项：
*．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡  **-*0分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
*．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在 *分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4．请每次测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本  OD值大于标准品孔*孔的 OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×*）。
*．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染
6．底物请避光保存。
*．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
*．本试剂不同批号组分不得混用。
*0.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。
计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的  OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与 OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的 OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。
试剂盒性能：
*.样品线性回归与预期浓度相关系数 R值为  0.**0以上。
2.批内与批见应分别小于 *%和  **%
检测范围：
0.*pmol/L -*.*pmol/L
小鼠胰高血糖素样肽酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期：
*.试剂盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6个月