大鼠α*微球蛋白（α*-MG）试剂盒实验原理 
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠α*-微球蛋白（α*-MG）水平。 用纯化的大鼠
α*-微球蛋白（α*-MG）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α*-
微球蛋白（α*-MG），再与 HRP 标记的α*-微球蛋白（α*-MG）抗体结合，形成抗体-抗原-酶
标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，
并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的α*-微球蛋白（α*-MG）呈正相
关。用酶标仪在 4*0nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠α*-微
球蛋白（α*-MG）浓度。   
试剂盒组成   
*  *0 倍浓缩洗涤液  20ml×*瓶  *  终止液  6ml×* 瓶 
2  酶标试剂  6ml×*瓶  8  标准品（*60ng/L）  0.*ml×* 瓶 
*  酶标包被板  *2 孔×8条  *  标准品稀释液  *.*ml×* 瓶 
4  样品稀释液  6ml×*瓶  *0  说明书  * 份 
*  显色剂A 液  6ml×*瓶  **  封板膜  2 张     
6  显色剂B液  6ml×*/瓶  *2  密封袋  * 个 
标本要求   
*．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能
马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 
2．不能检测含NaN*的样品，因NaN*抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 
大鼠α*微球蛋白（α*-MG）试剂盒操作步骤 
*.  标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀
释。 
480ng/L  * 号标准品  **0µl的原倍标准品加入**0µl标准品稀释液 
240ng/L  4 号标准品  **0µl的* 号标准品加入**0µl标准品稀释液 
*20ng/L  * 号标准品  **0µl的4 号标准品加入**0µl标准品稀释液 
60ng/L  2 号标准品  **0µl的* 号标准品加入**0µl标准品稀释液 
*0ng/L  * 号标准品  **0µl的2 号标准品加入**0µl标准品稀释液 
 2.  加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 、标准孔、待测样品孔。 在酶标包被板上标准品准确加样*0µl， 待测样品孔中先加样品稀释液40µl，
然后再加待测样品*0µl（样品zui终稀释度为*倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽
量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 
*.  温育：用封板膜封板后置**℃温育*0分钟。       
4.  配液：将*0 倍浓缩洗涤液用蒸馏水*0 倍稀释后备用 
*.  洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 *0 秒后弃去，如此
重复 *次，拍干。 
6.  加酶：每孔加入酶标试剂*0µl，空白孔除外。   
*.  温育：操作同*。 
8.  洗涤：操作同*。 
*.  显色：每孔先加入显色剂A*0µl，再加入显色剂B*0µl，轻轻震荡混匀，**℃避光显色
** 分钟. 
*0.  终止：每孔加终止液 *0µl，终止反应（此时蓝色立转黄色） 。 
**.  测定：以空白空调零，4*0nm波长依序测量各孔的吸光度（OD 值） 。 测定应在加终止
液后 **分钟以内进行。 
大鼠α*微球蛋白（α*-MG）试剂盒注意事项 
*．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 **-*0 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未
用完，板条应装入密封袋中保存。 
2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 
*．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好
控制在* 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 
4． 请每次测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值
大于标准品孔*孔的OD 值） ，请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计
算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×*） 。 
*． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 
6．底物请避光保存。 
*．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 
8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 
*．本试剂不同批号组分不得混用。 
*0.  如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 
大鼠α*微球蛋白（α*-MG）试剂盒保存条件及有效期 
*．试剂盒保存： ；2-8℃。 
2．有效期：6个月