呋喃咜酮（AMOZ）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒本试剂盒仅供研究使用。
*  使用目的：
本试剂盒用于动物组织（鸡、猪），蜂蜜和鸡蛋中呋喃咜酮（AMOZ）残留的定量检测。
2  实验原理
本试剂盒采用竞争 ELISA 方法，在微孔板包被有呋喃咜酮（AMOZ）偶联抗原，加入呋喃咜（AMOZ）标准品或样品，游离呋喃咜酮（AMOZ）与微孔条上预包被的呋喃咜酮（AMOZ）偶联抗原互相竞争抗呋喃咜酮（AMOZ）抗体酶标记物，用 TMB底物显色，加入终止液后颜色由蓝色变为黄色，用酶标仪在 4*0nm  波长下进行检测，吸光值与样品中呋喃咜酮（AMOZ）含量成反比，通过标准曲线计算样品中呋喃咜酮（AMOZ）的含量。
*  试剂盒组成呋喃咜酮（AMOZ）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒
*.* 预包被的呋喃咜酮（AMOZ）偶联抗原的可拆酶标板：*块（*2孔×8条）。
*.2呋喃咜酮（AMOZ）标准品：6瓶（*ml/瓶），含量分别是：0   ppb，0.* ppb,0.* ppb,0.* 
*.*抗呋喃咜酮（AMOZ）抗体酶结合物：*瓶（6ml）。
*.4显色液  A：*瓶（6ml）。
*.*显色液  B：*瓶（6ml）。
*.6终止液：*瓶（6ml），2M硫酸。
*.*样本稀释液：*瓶（*0×,      6ml），用于样品稀释用。
*.8浓缩洗涤液：*瓶（20×，20ml），用于洗板。
*.*说明书一份。
4  需要而未提供的材料
4.*  设备
4.*.*波长4*0nm酶标仪。
4.*.2粉碎机。
4.*.*量筒。
4.*.4振荡器。
4.*.*漏斗。
4.*.6Whatman No *或相当的滤纸。
4.*.*微量移液器。
4.2  试剂
4.2.*去离子水或蒸馏水。
4.2.2  甲醇。
*  贮存
*.* 试剂盒贮存于2~8℃，切勿冷冻
*.2  未用完的微孔板应该密封干燥保存
6  注意事项呋喃咜酮（AMOZ）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒说明书
6.*  使用试剂盒前请仔细阅读说明书。
6.2  不要使用过期试剂盒。
6.*试剂盒使用前，将试剂恢复至室温（2*±2℃），建议至少回温2小时。
6.4标准品中含有呋喃咜酮（AMOZ），使用时应特别注意，操作时应带手套。
6.*终止液中含有硫酸，使用时防止灼伤皮肤及腐蚀衣物。
6.6不同标准品、样品所用吸头不能混用，否则会影响试验结果。
6.*不同批号试剂盒中的试剂不得混用；不同标准品、样品所用吸头不得混用，否则会影响实验结果。
6.8稀释样本时必须用本试剂盒中的样本稀释液，否则会影响实验结果
6.*混合试剂时应避免起泡。
*工作液准备呋喃咜酮（AMOZ）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒
*.*呋喃咜酮（AMOZ）标准品溶液：0ppb,0.*ppb,0.*   ppb,0.*ppb,2.* ppb,8.*ppb
*.2浓缩洗涤液：用蒸馏水按*:20(*+**)稀释备用
*.*样本稀释液：用蒸馏水按*:*0(*+*)稀释备用
*.*显色剂：已备用，避免光线直照
*.4反应终止液：已备用
8样品处理程序（样品在提取过程中，要严格按说明书操作，提取过程中应准确稀释，否则会出现结果不准确，样品应当保存在阴凉避光之处及冷藏保存）
8.*取*0g粉碎的样品，加  20ml *0%甲醇溶液
8.2强力振荡*分钟
8.*用Whatman No *滤纸过滤
8.4取2*μl处理后的样品，加入2*μl样本稀释液于反应孔中（样本稀释倍数为2）
*酶免分析步骤
*.*实验须知
*.*.*实验开始前请将所有试剂于盒外充分恢复至室温（2*±2℃），时间约2小时。回温至室温（2*±2℃）后再取出微孔条，多余的微孔条重新密封立即于2~8℃干燥保存注：一定保证回温充分，否则影响检测的精确度和准确度。
*.*.2使用后请立即将试剂放回2~8℃保存
*.*.*请不要改变分析程序
*.*.4请使用精确的微量移液器
*.*.*操作一旦开始，请不要中断任何程序
*.*.6 ELISA结果的可重复性极大程度的取决于操作程序，请严格按照要求操作
*.*.*为避免交叉污染，每个标准品和样品均应使用不同的吸头加样
*.*.8加样时请勿让吸头接触微孔中的溶液或内表面
*.2分析步骤
*.2.*预先进行编号，标记B0、标准品和样品的位置，推荐进行双孔检测
*.2.2取所需数量的微孔（微孔条可拆），将多余板条重新密封并立即放回2~8℃保存
*.2.*样品稀释液（*0×）、浓缩洗涤液（20×）稀释成工作液(蒸馏水或去离子水稀释)
*.2.4在B0孔中加入*0μ   0ppb标准品溶液
*.2.*在各标准孔中加入*0μl的标准品溶液
*.2.6在各样品孔中加入*0μl样品溶液
*.2.*在所有孔中加入*0μl的抗呋喃咜酮（AMOZ）抗体酶结合物
*.2.8轻轻晃动反应板几秒钟。
*.* **℃温浴*0min（温浴过程中不时轻拍反应板，可以减少双孔误差）
*.*.*甩掉孔中液体，用洗液洗涤微孔板*次，zui后一次应在吸水纸上拍打以完全除去孔中液体。
*.4反应
*.4.*洗涤程序完成后，立即用微量移液器在每个微孔中先加入*0μl显色液A，再加    *0μl显色液B；轻微晃动反应板使之彻底混匀
*.4.2 **℃温浴*0min
*.4.*每孔中加入*0μl终止液，混匀
*.4.4在4*0nm下检测吸光度，结果在*min内读取。
*0结果计算
*0.*定量分析
*0.*.*所获得的每个浓度标准溶液和样本吸光度值的平均值（B）除以*个标准（0标准）的吸光度值（B0）再乘以*00%，即百分吸光度值。
B—标准溶液或样本溶液的平均吸光度值
B0—0μg/L标准溶液的平均吸光度值
*0.*.2以呋喃咜酮（AMOZ）浓度的对数值为X轴，百分吸光度值为Y轴，绘制标准曲线图。根据样品百分吸光度值，可从曲线上得到对应点的横坐标，即为呋喃咜酮（AMOZ）浓度的对数值，求得反对数即为测定液中呋喃咜酮（AMOZ）浓度C（ppb）
*0.*.*由于样品经过了预先稀释，因此根据标准曲线所得出的样品浓度一定要再乘以其稀释倍数。
*0.2半定量测定呋喃咜酮（AMOZ）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒说明书
*0.*.*目测半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品吸光度值的高低比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。
*0.*.2仪器半定量测定：首先选择一个适当的标准液与样品同运行，根据样品与标准品颜色深浅比较，判断样品浓度值是小于还是大于标准值。