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人抗Abeta抗体IgG酶联免疫分析试剂盒

分类:诊断试剂 发布时间:2018-06-05 15:42 所在地:
286℃

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详细内容

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人抗Abeta抗体IgG酶联免疫分析试剂盒实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)表达。用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可与样品中抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在4*0nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中人抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)的存在与否。
标本要求 
*.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN*的样品,因NaN*抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
*.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照*孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)
2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照*0μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品*0μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,
*.温育:用封板膜封板后置**℃温育*0分钟。   
4.配液:将*0倍浓缩洗涤液用蒸馏水*0倍稀释后备用
*.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置*0秒后弃去,如此重复*次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂*0μl,空白孔除外。 
*.温育:操作同*。
8.洗涤:操作同*。
*.显色:每孔先加入显色剂A*0μl,再加入显色剂B*0μl,轻轻震荡混匀,**℃避光显色*0分钟.
*0.终止:每孔加终止液*0μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
**.测定:以空白空调零,4*0nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后**分钟以内进行。
人抗Abeta抗体IgG酶联免疫分析试剂盒操作程序总结:
计算和结果判定:
  试验有效性:阳性对照孔平均值≥*.00; 阴性对照平均值≤0.*0
  临界值(CUT OFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.**
  阴性判定:样品OD值< 临界值(CUT OFF)者为抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)阴性
  阳性判定:样品OD值≥ 临界值(CUT OFF)者为抗Abeta抗体IgG(Abeta IgG)阳性
。 
注意事项
*.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡**-*0分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
*.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
*.底物请避光保存。
6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为6*0nm
*.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。
人抗Abeta抗体IgG酶联免疫分析试剂盒保存条件及有效期
*.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月
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