WSU-DLCL2细胞复苏人弥漫大B淋巴瘤 "

培养细胞真的不难，最关键几点：
*.所有的东西使用*的，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏。
2.动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因。
*.有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措。
4.要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，细胞房的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验。
*.个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，最近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢。
6.细胞房不能进去太多人，避免相互干扰。
每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?
*.严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干。
2.不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套。
*.有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测。
4.水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)。
*.晚上离开的时候*给细胞房照紫外，超净台是用完就开。
6.*的是同一时间就你一个人在用细胞房在养细胞。
养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：
*.培养细胞前，可以看看细胞特点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2.不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-2**，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是特别慢，等的人心焦，BT4*4就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了。
*.对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。
4.冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。
*.培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次。
6.养细胞*的教训：不能偷懒!
细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。
*.不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存。
2.发现有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下。
*.细胞房日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸。
4.细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延。
*.注意个人卫生。" "

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动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍：
一、CO2培养箱：CO2培养箱是细胞培养的必备仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO2培养箱的灭菌和抑菌能力就显得尤为重要。
二、烘箱(干燥箱)：用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用，玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时，烘箱内温度一般要达到*60℃以上，通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好，缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始，至*00℃时，停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦，烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门，以免骤冷导致玻璃器皿破裂，应等温度自然下降至*00℃以下后可开门。
三、超净工作台/生物安全柜：细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在*00级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。
四、液氮罐：为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-**6℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。
五、超低温冰箱：细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般4℃下存放*0 min，转放-20℃ * hour，再转入-*0至-80℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-**6℃)，这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。
六、恒温水浴：从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于**℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。
七、离心机：细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。
除上述仪器外，移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器，发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。" "

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