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NAMALWA细胞系技术硬人Burkitt's淋巴瘤

分类:诊断试剂 发布时间:2018-04-13 14:49 所在地:
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NAMALWA细胞系技术硬人Burkitt's淋巴瘤 "

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ACC-*62 PA-TU-8*88T贴壁培养细胞株;细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外*大学建系,公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!
ACC-*6* NCI-H*2*贴壁培养细胞株;细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外*大学建系,公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!" NAMALWA细胞系技术硬人Burkitt's淋巴瘤 "

有关实验室细胞培养基知识普及:
经典的培养基有很多种,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI *640、MEM、DMEM/F*2都是应用最广泛的培养基。其他如M***、IMDM、L**培养基等也用于某些细胞的培养。
MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。
BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO*-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为*000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4*00 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。
aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。
Ham’s F*2是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F*2还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。
RPMI *640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
干粉培养基:以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。如果使用液体培养基,这种人为的误差会减少,因为毕竟是大批量工业化生产的,批间差会很小。大家是不是感觉液体培养基会贵很多,以前是这样,但现在大家都认同了。 
无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少上述血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。但它也不是*的,从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外,它的价格也比普通的培养基贵很多。" "

细胞培养相关培养基选购基本指南:
如何选择培养基:经常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单,也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库,那很简单,问供应商就行了。或者找到相关的文献,作为参考。
培养基这么多种,要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的,或者是专门针对某一种细胞的,如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基, 但是大部分液体培养基都是专利配方的,也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐,然后用自己的细胞做几次传代培养来选出最合适的培养基。毕竟实践出真知。
怎么样才可以买到好的培养基产品:首先,当然需要找对品牌,其次是找对自己所在区域的品牌代理商,针对自己所养的细胞,咨询供应商该选用哪种的培养基进行培养,这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。
关于培养基品牌,目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品,也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的产品。
培养基的选择和使用
MEM:成分简单,贴壁细胞*。
DMEM:分高糖型和低糖型。
IDMEM:适合细胞密度低,生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选,DNA转染后转化细胞的筛选培养。
RPM*640:应用最广泛的培养基之一。悬浮细胞培养*,主要针对淋巴细胞,也适合其他细胞。
***、*0*培养基:成分齐全,培养效果较好。
F*0培养基:适合小鼠及人类二倍体细胞培养。
F*2培养基:适合单细胞分离培养及无血清培养。
McCoy’s*培养基:特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。" "

公司提供部分ATCC细胞有(限于页面篇幅,公司全部细胞并未展示,如有具体所需细胞,请咨询我们哦┈技┈术(订┈购)┈热┈线┈:┈1┈8┈3┈0┈1┈9┈0┈8┈2┈7┈9┈;HTB-*8|SK-MES-*细胞;HTB-**|Calu-*细胞;HTB-*6|Calu-6细胞;CCL-***|MRC-*细胞;CCL-**|WI-*8细胞;CRL-8024|PLC/PRF/*细胞;HTB-**|SK-LU-*细胞;CCL-2**|Hs888Lu细胞;HTB-**2|NCI-H20*细胞;CRL-***2|*86-O细胞;CRL-*2*6|2**T细胞;CRL-**268|2**T/**细胞;CRL-2**0|HK-2细胞;CRL-****|*6*-P细胞;HTB-46|Caki-*细胞;CCL-*0*|SW-**细胞;HTB-44|A4*8细胞;CRL-*6**|ACHN细胞;HTB-4|T24细胞;HTB-*|ScaBER细胞;HTB-2|RT4细胞;HTB-*|J82细胞;HTB-*|*6**细胞;CCL-**|Y*细胞;HTB-4*|A-*04细胞;HTB-22|MCF-*细胞;HTB-26|MDA-MB-2**细胞;HTB-**2|MDA-MB-468细胞;CRL-2**6|HCC****细胞;HTB-*28|MDA-MB-4**细胞;HTB-*2*|MDA-MB-4**S细胞;HTB-**0|MDA-MB-4*6细胞;HTB-***|MDA-MB-4**细胞;HTB-*0|SK-BR-*细胞;CRL-2***|4T*细胞;CRL-2**4|HCC*8细胞;HTB-*22|BT-*4*细胞;HTB-20|BT-4*4细胞;CRL-2*22|CCD-*0**Sk细胞;HTB-*8|Sw626细胞;HTB-*6*|OVCaR-*细胞;HTB-**|Caov-*细胞;CRL-***2|PA-*细胞;HTB-**|SK-OV-*细胞;CRL-***8|ES-2细胞;HTB-**2|HEC-*-A细胞;HTB-***|HEC-*-B细胞;CRL-*622|KLE细胞;" "

细胞传代培养的胰酶消化法:
传代培养:是指细胞从一个培养瓶以*:2或*:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。
实验步骤:① 入无菌室之前用肥皂洗手,再用**% 的酒精擦拭消毒双手;
② 倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液**℃下预热。
③ 超净台台面应整洁,用**%酒精棉球擦拭清洁;
④ 打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;
⑤ 点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。
⑥ 将培养用液瓶口用**%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。
⑦ 倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-*ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下。
⑧ 每个大培养瓶加入*ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中。
⑨ 加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(*-*0ml/大瓶;*-*ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱。
⑩ 对悬浮培养细胞,步骤*-*不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
注意事项
① 传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次*只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材。
② 每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代。
③ 如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。
传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。
对每一个细胞系来说都有其自身的特点,要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。"


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