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天成医疗网首页> 供应信息> 诊断试剂> NCI-H157细胞系技术硬人肺腺癌

NCI-H157细胞系技术硬人肺腺癌

分类:诊断试剂 发布时间:2018-04-13 14:45 所在地:
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NCI-H***细胞系技术硬人肺腺癌 "

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ACC-*4* MH-****A传代细胞株;细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外*大学建系,公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!
ACC-*46 HD-MY-Z传代细胞株;细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外*大学建系,公司提供背景资料、生物体、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件等复苏及冻存说明书信息,我们拥有丰富的细胞系培养经验,能提供细胞培养全方位的技术支持,让您实验再无烦扰!" NCI-H***细胞系技术硬人肺腺癌 "

培养细胞真的不难,最关键几点:
*.所有的东西使用*的,如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的,真的很难相信你会把细胞养坏。
2.动作要快,胰酶消化,换液什么,细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外,要掌握好胰酶消化时间,所谓的细胞状态差,很多时候是传代的原因。
*.有时间的话,需要细胞计数,传相应数目的细胞到培养皿中,可以大致清楚细胞的生长曲线,不会临时要处理,手足无措。
4.要做什么心里要非常清楚,合理安排时间,细胞房的实验穿插进行,可以节省很多时间,也不会耽误别人的实验。
*.个人的实验器具自己收一套,不要和别人混用,最近换了什么新的东西稍微记一下,试剂一旦怀疑污染,马上丢。
6.细胞房不能进去太多人,避免相互干扰。
每天对待细胞比孝敬爹妈还用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丢了,培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?
*.严格无菌操作,多喷喷酒精,要是对灭菌的东西不放心,自己包自己送自己烘干。
2.不要和别人共用试剂耗材,自己准备一套。
*.有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测。
4.水浴锅很脏,生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏,勤换(灭菌水加进去)。
*.晚上离开的时候*给细胞房照紫外,超净台是用完就开。
6.*的是同一时间就你一个人在用细胞房在养细胞。
养了几年细胞,说一点自己培养细胞方面的看法:
*.培养细胞前,可以看看细胞特点说明书,包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等。
2.不同细胞生长周期不同,有的生长很快,比如说MDA-MB-2**,传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了,有的又是特别慢,等的人心焦,BT4*4就是,传代是一分二,复苏起始的时候两周多才能长满,所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了。
*.对于娇弱的细胞,就得细心呵护了,胰酶消化不能过久,吹得时候要轻柔,离心时候也要注意转速和时间,每天都要去看一下细胞,肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况。
4.冻存细胞复苏后第二天*更换一次培养基。
*.培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次。
6.养细胞*的教训:不能偷懒!
细胞虐我千百遍,我待细胞如初恋。
*.不管买的细胞、惠赠的细胞,刚拿到手赶紧做两件事:检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存。
2.发现有污染迅速处理掉,特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染,真菌污染很容易发现,支原体污染的话,细胞会长的慢,买个支原体检测的kit定期检测一下。
*.细胞房日常的值日清洁是必须的,此外还要定期熏蒸。
4.细胞的传代一定要规律,保持相同的confluency和传代时间间隔,不要随心所欲或者拖延。
*.注意个人卫生。" "

细胞接收操作说明:请仔细阅读本操作说明及相应的细胞说明书。
本公司细胞发货有四种形式:T2*培养瓶(一般是贴壁细胞使用,悬浮细胞也可以)、离心管(悬浮细胞使用多,当然,有些公司也会用这种离心管形式发贴壁细胞,但是,长期经验来说,贴壁细胞容易发生形态变化,估计是细胞培养空间狭小,血清不足导致(最主要是怕运输延误导致这些情况发生),个人不建议用离心管形式发贴壁细胞)及干冰(冻存细胞用,主要是冬天天气冷,温度低于4℃的地方,都要考虑冻存细胞)。
T2*培养瓶:是用T2*细胞培养瓶直接发货的形式。收到细胞后,拆开包装T2*培养瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷**%酒精消毒后显微镜观察细胞状态(有条件可以拍下此时细胞照片)。将细胞放入**度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T2*中培养基取出装好备用,如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入*-6ml培养基放回培养箱继续培养即可。
离心管:是用**ml离心管发货的形式,只用于悬浮细胞发货。收到细胞后消毒处理及将细胞放入**度培养箱平衡两小时以上,再处理细胞。首先将T2*中培养基取出装好备用(如果实验室没有T2*培养瓶,可以暂时T** 培养瓶,加入*0-**ml培养基,,建议*0ml培养基,也可以使用T*** 培养瓶,加入*0-60ml培养基,培养瓶越大,需要的培养基越多。当然如果刚接收到细胞密度不够的话,*不用大瓶子,先用小瓶子养起来再换大的,不然会长得很慢,严重的,会导致细胞死亡等危险),平衡完成后,离心(*000rpm,*min)收集细胞,弃上清,用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。
干冰:是用本公司冻存液冻存细胞后,直接用干冰将冻存的细胞冷冻发货的形式。收到细胞后按照细胞复苏的步骤操作即可。
接收细胞相关问题:如不能在收到细胞后及时操作细胞,T2*及离心管发货的细胞将可以消毒后在**度过夜,血清发货的细胞在室温下静置*-2天(注意不要放冰箱),干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,请即刻复苏细胞。
T2*瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境,同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁,此步骤非常必要。T2*瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞,可以收集上清后离心(*200rpm,*min)后,将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。
部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(*000rpm,*min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。" "

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从最基础的地方教起,一步一步详细介绍细胞培养技术,非常好的开门教程
常用设备
准备室的设备:单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、
高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品柜(放置消毒过的物品)、包装台。
配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)。
培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外灯、空气净化器系统、低温冰箱(-80℃)、空调、二氧化碳缸瓶、边台(书写实验记录)。
必须放在无菌间的设备:离心机(收集细胞)、超净工作台、倒置显微镜、CO2孵箱(孵育培养物)、水浴锅、三氧消毒杀菌机、4℃冰箱(放置serum和培养用液)。
无菌操作
无菌室的灭菌:
定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用*‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.*%过氧乙酸擦拭。
CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用*‰新洁尔灭擦拭,然后用**%酒精擦拭或者0.*%过氧乙酸,再用紫外灯照射
实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器系统各20-*0分钟
实验后灭菌:用**%酒精(*‰新洁尔灭)擦拭超净台、边台、倒置显微镜的载物台。
实验人员的无菌准备:
肥皂洗手。
穿好隔离衣、带好隔离帽、口罩、放好拖鞋
用**%酒精棉球擦净双手。"


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