鱼生长激素（GH）酶联免疫分析ELISA试剂盒检测范围：0.6μg/L-*6μg/L

使用目的：

本试剂盒用于测定鱼血清、血浆及相关液体样本中生长激素（GH）含量。

实验原理

本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鱼生长激素（GH）水平。用纯化的鱼生长激素（GH）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入生长激素（GH），再与HRP标记的生长激素（GH）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的生长激素（GH）呈正相关。用酶标仪在4*0nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鱼生长激素（GH）浓度。

试剂盒组成

**0倍浓缩洗涤液20ml×*瓶*终止液6ml×*瓶

2酶标试剂6ml×*瓶8标准品（*2μg/L）0.*ml×*瓶

*酶标包被板*2孔×8条*标准品稀释液*.*ml×*瓶

4样品稀释液6ml×*瓶*0说明书*份

*显色剂A液6ml×*瓶**封板膜2张

6显色剂B液6ml×*/瓶*2密封袋*个

标本要求

*．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN*的样品，因NaN*抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

*6μg/L*号标准品**0μl的原倍标准品加入**0μl标准品稀释液

8μg/L4号标准品**0μl的*号标准品加入**0μl标准品稀释液

4μg/L*号标准品**0μl的4号标准品加入**0μl标准品稀释液

2μg/L2号标准品**0μl的*号标准品加入**0μl标准品稀释液

*μg/L*号标准品**0μl的2号标准品加入**0μl标准品稀释液

加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样*0μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品*0μl（样品最终稀释度为*倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。

温育：用封板膜封板后置**℃温育*0分钟。

配液：将*0倍浓缩洗涤液用蒸馏水*0倍稀释后备用

洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置*0秒后弃去，如此重复*次，拍干。

加酶：每孔加入酶标试剂*0μl，空白孔除外。

温育：操作同*。

洗涤：操作同*。

显色：每孔先加入显色剂A*0μl，再加入显色剂B*0μl，轻轻震荡混匀，**℃避光显色**分钟.

终止：每孔加终止液*0μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。

测定：以空白空调零，4*0nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后**分钟以内进行。

鱼生长激素（GH）酶联免疫分析ELISA试剂盒操作程序总结：

计算

以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

注意事项

*．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡**-*0分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。

*．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间*控制在*分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。

请每次测定的同时做标准曲线，*做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔*孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请*乘以总稀释倍数（×n×*）。

封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

*．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

*．本试剂不同批号组分不得混用。

*0.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

鱼生长激素（GH）酶联免疫分析ELISA试剂盒保存条件及有效期

*．试剂盒保存：；2-8℃。

2．有效期：6个月