详细内容
*.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.*2以上。
2.批内与批见应分别小于*%和**%
兔子巨噬细胞炎性蛋白*α(MIP-*α/CCL*)ELISA Kit
操作方法:
*.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内封存于2-8℃。
2.预留空白孔(若使用双波长读板,空白孔可以不设)。
*.分别将标本或不同浓度人IL-2标准品(0pg/ml孔加标准品稀释液)加入相应孔中(*00μl/孔),用封板胶纸封住反应孔,**℃孵箱孵育*0分钟。
4.提前*0分钟制备生物素化人IL-2抗体工作液。
*.洗板*次。
6.加入生物素化人IL-2抗体工作液(*00μl/孔)。用封板胶纸封住反应孔,**℃孵箱孵育60分钟。
*.提前*0分钟制备酶结合物工作液。室温避光放置。
8.洗板*次。
*.除空白孔外,加入酶结合物工作液(*00μl/孔)。用封板胶纸封住反应孔,**℃孵箱,避光孵育*0分钟。
*0.洗板*次。
**.加入TMB显色工作液(包括空白孔)*00μl/孔,**℃孵箱,避光孵育,当标准曲线高浓度的颜色较深,有明显的颜色梯度的时候,即可终止。试验显色反应请勿超过*0分钟。
*2.加入终止液(包括空白孔)*00μl/孔,混匀后即刻测量OD(4*0nm)值(*0分钟内)。
兔子巨噬细胞炎性蛋白*α(MIP-*α/CCL*)ELISA Kit
兔子巨噬细胞炎性蛋白*α(MIP-*α/CCL*)ELISA Kit注意事项:
*.试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品,其他成分不可冻结。
2.浓缩生物素化人IL-2抗体,浓缩酶结合物体积小,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或*000rpm离心*分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。
*.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,使结晶完全溶解后再配制洗涤液。
4.测试过程中,人IL-2冻干标准品为一次性使用,不得分装。因其浓度较低,溶解两小时候后,会迅速失活。
*.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。
6.配制试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充分混匀对测试结果尤为重要,*使用微量振荡器(使用*频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻晃动酶标板*分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反应液混匀。
*.实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作,并在使用前充分预热。
8.酶免试验中人IL-2标准品和样本检测时建议作复孔。
*.将不用的微孔板放进原铝箔袋中,置2-8℃保存。
*0.显色液对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。
**.超过使用有效日期的试剂盒不能应用于实验中。
*2.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,波长应该设置为4*0nm和6*0nm.
**.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸,使用时必须注意安全。
*4.各步骤加样均应使用加样器,并经常校准其准确性,以避免试验误差。一次加样时间*控制在*分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
**.每次试验测定的同时做标准曲线,*做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请*乘以总稀释倍数(×n×*)。
*6.不能检测含NaN*的样品,因NaN*抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
**.以洗板机洗板时,每孔注液量不应少于**0μl, 注意检查加样头是否堵塞。手工洗板时, 用带纸屑的吸水材料应慎重, 防止外源性过氧化物酶类似物或氧化还原物与显色剂发生反应。
*8.用终止液终止反应后,请于*0分钟内读取OD值。
**.进行复孔实验时,结果计算一定要求平均值。
20.标本溶血可能会有假阳性结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
2*.试验时,应该将加过样品的板条放于密闭盒内,并保持湿度约60%左右。
22.为保证恒温箱内的温度为**℃,恒温箱的温度要经常校准。以确保实验温度保持恒定。
2*.兔子巨噬细胞炎性蛋白*α(MIP-*α/CCL*)ELISA Kit48T的试剂盒,所有组分均为*6T的*0%的量。