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肠毒素C2酶联免疫分析试剂盒说明书

分类:诊断试剂 发布时间:2017-07-14 16:56 所在地:
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详细内容

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肠毒素C2酶联免疫分析试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
使用目的:
本试剂盒用于测定样本中肠毒素C2含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中肠毒素C2水平。用纯化的肠毒素C2抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肠毒素C2,再与HRP标记的肠毒素C2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肠毒素C2呈正相关。用酶标仪在4*0nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中肠毒素C2浓度。 
试剂盒组成 

标本要求 
*.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN*的样品,因NaN*抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
肠毒素C2酶联免疫分析肠毒素C2酶联免疫分析试剂盒使用说明书操作步骤
*.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样*0μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品*0μl(样品最终稀释度为*倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
*.温育:用封板膜封板后置**℃温育*0分钟。   
4.配液:将*0倍浓缩洗涤液用蒸馏水*0倍稀释后备用
*.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置*0秒后弃去,如此重复*次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂*0μl,空白孔除外。 
*.温育:操作同*。
8.洗涤:操作同*。
*.显色:每孔先加入显色剂A*0μl,再加入显色剂B*0μl,轻轻震荡混匀,**℃避光显色**分钟.
*0.终止:每孔加终止液*0μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
**.肠毒素C2酶联免疫分析试剂盒测定:以空白空调零,4*0nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后**分钟以内进行。
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