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    小鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒实验原理

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    小鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒实验原理 
    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。用纯化的人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),再与HRP标记的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)浓度。
    试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶 7终止液 6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶 8 标准品(320µg/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板 12孔×8条9 标准品稀释液1.5ml×1瓶 4样品稀释液 6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶 11 封板膜2张6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋
    1个 
    标本要求 1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能 马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融 2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
    操作步骤 1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀 释。160µg/L5号标准品150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液80µg/L4号标准品150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液40µg/L3号标准品150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液20µg/L2号标准品150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液10µg/L 1号标准品 150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液 2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
    待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。 9.显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 10分钟. 10.终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。
    准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。 
    注意事项 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未 用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好 控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值 大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。
     PⅢNP 小鼠Ⅲ型前胶原肽 规格: 48T/96T
     PⅢNT 小鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽 规格: 48T/96T
     Col Ⅲ 小鼠Ⅲ型胶原 规格: 48T/96T
     Col Ⅱ 小鼠Ⅱ型胶原 规格: 48T/96T
      OH 小鼠25羟基维生素D3 规格: 48T/96T
     PⅠCP 小鼠Ⅰ型前胶原羧基端肽 规格: 48T/96T
     CⅠCP 小鼠Ⅰ型前胶原C末端肽 规格: 48T/96T
     NTX 小鼠Ⅰ型胶原N末端肽 规格: 48T/96T
     Col Ⅰ 小鼠Ⅰ型胶原 规格: 48T/96T
     17-KS 小鼠17-酮类固醇 规格: 48T/96T
     17-OHP 小鼠17羟孕酮 规格: 48T/96T
     17-OHCS 小鼠17羟皮质类固醇 规格: 48T/96T
     16-α OHE-1 小鼠16α羟基雌酮1 规格: 48T/96T
     15-LO/LOX 小鼠15脂加氧酶 规格: 48T/96T
     1,3-βD glu 小鼠1,3-βD葡葡糖苷酶 规格: 48T/96T
     PSA 豌豆凝集素 规格: 48T/96T
     HIS 豚鼠组胺 规格: 48T/96T
     TGF-β1 豚鼠转化生长因子β1 规格: 48T/96T
     MHC/GPLA 豚鼠主要组织相容性复合体 规格: 48T/96T
     TNF-α 豚鼠肿瘤坏死因子α 规格: 48T/96T
     CH50 豚鼠血清总补体 规格: 48T/96T
     NO 豚鼠血清一氧化氮 规格: 48T/96T
     PAP 豚鼠纤溶酶抗纤溶酶复合物 规格: 48T/96T
     AGEs 豚鼠晚期糖基化终末产物 规格: 48T/96T
     GH 豚鼠生长激素 规格: 48T/96T
     eNOS 豚鼠内皮型一氧化氮合成酶 规格: 48T/96T
     ET-1 豚鼠内皮素1 规格: 48T/96T
     ET-1 豚鼠内皮素1 规格: 48T/96T
     IgG 豚鼠免疫球蛋白G 规格: 48T/96T
     IgE 豚鼠免疫球蛋白E 规格: 48T/96T
     IgA 豚鼠免疫球蛋白A 规格: 48T/96T
     OVA sIgG 豚鼠卵清蛋白特异性IgG 规格: 48T/96T
     OVA sIgE 豚鼠卵清蛋白特异性IgE 规格: 48T/96T
     CGRP 豚鼠降钙素基因相关肽 规格: 48T/96T
     TIMP-1 豚鼠基质金属蛋白酶抑制因子1 规格: 48T/96T
     MMP-9 豚鼠基质金属蛋白酶9 规格: 48T/96T
     LPO 豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶 规格: 48T/96T
     Lebtospira 豚鼠钩端螺旋体IgG 规格: 48T/96T
     HGF 豚鼠肝细胞生长因子 规格: 48T/96T
     TE 豚鼠端粒酶 规格: 48T/96T
     MCP-4/CCL13 豚鼠单核细胞趋化蛋白4 规格: 48T/96T
     FSH 豚鼠促卵泡素 规格: 48T/96T
     SOD 豚鼠超氧化物歧化酶 规格: 48T/96T
     iFABP 豚鼠肠脂肪酸结合蛋白 规格: 48T/96T
     EGF 豚鼠表皮生长因子 规格: 48T/96T
     LTD4 豚鼠白三烯D4 规格: 48T/96T
     LTB4 豚鼠白三烯B4 规格: 48T/96T
     IL-4 豚鼠白介素4 规格: 48T/96T
     IL1Ra 豚鼠白介素1受体拮抗剂 规格: 48T/96T
     IL-12/P70 豚鼠白介素12 规格: 48T/96T
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