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培养皿的高压蒸汽灭菌

培养皿是用于细胞或微生物培养的一种实验室器皿。一般来说,培养皿的灭菌方法有两种:一种是干热灭菌,即直接把培养皿放入干燥箱中烘干;另一种是湿热灭菌,即高压蒸汽灭菌的方法。
培养皿的高压蒸汽灭菌

培养皿是用于细胞或微生物培养的一种实验室器皿。一般来说,培养皿的灭菌方法有两种:一种是干热灭菌,即直接把培养皿放入干燥箱中烘干;另一种是湿热灭菌,即高压蒸汽灭菌的方法。

 

高压蒸汽灭菌的原理

高压蒸汽灭菌就是把需要灭菌的物品放进一个密闭的加热灭菌锅内,通过灭菌锅加热,使得灭菌锅内隔套间的水沸腾而产生水蒸汽。等到水蒸汽将灭菌锅内的冷空气通过排气阀驱除干净之后,再关闭排气阀,继续加热,而此时因为水蒸汽不能从排气阀溢出,所以增加了灭菌锅内的压力,从而使锅内水的沸点增高,锅内温度能够高于100℃,使菌体的蛋白质凝固变性从而能够达到灭菌的目的。

在使用灭菌锅灭菌时,灭菌锅内冷空气是否完全排出十分重要,因为空气的膨胀压比水蒸汽的大,所以,在相同的压力下,若水蒸汽中含有空气,则水蒸汽的温度将低于饱和蒸汽的温度。

 

培养皿高压蒸汽灭菌的步骤

1. 加水:将高压蒸汽灭菌锅的内层锅取出,再往外层锅中加入适量的水,最佳水位是使水的平面与锅内三角搁架相平。

  2. 装锅:放回内层锅,并将培养皿放入锅内。

3. 加盖:将锅盖上用于排气的软管插入到内层锅的排气槽中。再以两两相对的方式同时扭紧相对应的两个螺栓,使螺栓的松紧一致,勿使漏气。

4. 加热与排气:打开放气阀,然后接通电源开始进行加热,直到锅内的水沸腾并且有大量的水蒸汽从放气阀冒出时,维持3-5分钟使锅内的冷空气全部排出。等到冷空气完全排尽以后,再将放气阀关闭,让灭菌锅内的温度随着蒸汽压力的增加而逐渐上升。

  5. 保温保压:当锅内压力升到所需压力值之后,控制热源,维持所需压力值直到所需时间。

6. 出锅:灭菌所需的时间到后,关闭灭菌锅电源,等待锅内的温度自然下降,直到压力表的数值降到"0"之后,才可以将灭菌锅的放气阀打开,将螺栓钮松并打开灭菌锅的盖子,取出培养皿。

7. 保养:灭菌完毕后,将灭菌锅内剩下的水倒出,保持锅的内壁及内胆干燥,并将灭菌锅的锅盖盖好。


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