培养皿是用于细胞或微生物培养的一种实验室器皿。一般来说，培养皿的灭菌方法有两种：一种是干热灭菌，即直接把培养皿放入干燥箱中烘干；另一种是湿热灭菌，即高压蒸汽灭菌的方法。

高压蒸汽灭菌的原理

高压蒸汽灭菌就是把需要灭菌的物品放进一个密闭的加热灭菌锅内，通过灭菌锅加热，使得灭菌锅内隔套间的水沸腾而产生水蒸汽。等到水蒸汽将灭菌锅内的冷空气通过排气阀驱除干净之后，再关闭排气阀，继续加热，而此时因为水蒸汽不能从排气阀溢出，所以增加了灭菌锅内的压力，从而使锅内水的沸点增高，锅内温度能够高于100℃，使菌体的蛋白质凝固变性从而能够达到灭菌的目的。

在使用灭菌锅灭菌时，灭菌锅内冷空气是否完全排出十分重要，因为空气的膨胀压比水蒸汽的大，所以，在相同的压力下，若水蒸汽中含有空气，则水蒸汽的温度将低于饱和蒸汽的温度。

培养皿高压蒸汽灭菌的步骤

1. 加水：将高压蒸汽灭菌锅的内层锅取出，再往外层锅中加入适量的水，最佳水位是使水的平面与锅内三角搁架相平。

  2. 装锅：放回内层锅，并将培养皿放入锅内。

3. 加盖：将锅盖上用于排气的软管插入到内层锅的排气槽中。再以两两相对的方式同时扭紧相对应的两个螺栓，使螺栓的松紧一致，勿使漏气。

4. 加热与排气：打开放气阀，然后接通电源开始进行加热，直到锅内的水沸腾并且有大量的水蒸汽从放气阀冒出时，维持3-5分钟使锅内的冷空气全部排出。等到冷空气完全排尽以后，再将放气阀关闭，让灭菌锅内的温度随着蒸汽压力的增加而逐渐上升。

  5. 保温保压：当锅内压力升到所需压力值之后，控制热源，维持所需压力值直到所需时间。

6. 出锅：灭菌所需的时间到后，关闭灭菌锅电源，等待锅内的温度自然下降，直到压力表的数值降到"0"之后，才可以将灭菌锅的放气阀打开，将螺栓钮松并打开灭菌锅的盖子，取出培养皿。

7. 保养：灭菌完毕后，将灭菌锅内剩下的水倒出，保持锅的内壁及内胆干燥，并将灭菌锅的锅盖盖好。